荧光检测滤光片的原理及作用

2024-08-05 派大星

荧光检测滤光片是一种用于荧光分析、荧光显微镜等领域的光学元件,它一般由光学性能优良、热膨胀系数小的材料如光学玻璃(如硼硅酸玻璃、石英玻璃等)或熔融石英作为基底通过在基底上镀上多层介质膜镀膜材料:金属如银、铝、金等、金属氧化物如二氧化硅、二氧化钛等、氟化物等,这些介质膜的厚度和折射率经过精密计算,以实现对特定波长的光的选择性透过或反射经过滤光片的各项参数指标进行测量后满足指标才算真正的制造完成。


 荧光检测滤光片的原理及作用

(图源网络,侵删)

荧光检测滤光片的原理

荧光物质在吸收特定波长的光(激发光)后,会发射出波长较长的光(发射光)。荧光滤光片就是根据这个原理,通过选择性的透光特性,将激发光和发射光分离,从而实现对荧光信号的检测。

 荧光显微镜光学原理

(图源网络,侵删)

荧光检测滤光片分类

常见的荧光显微镜中,由荧光滤光片通常组合成滤光块。一个典型的滤光块包括激发滤光片、发射滤光片以及二向色镜。

激发滤光片: 透过激发光,阻挡其他波长的光。

发射滤光片: 透过发射光,阻挡激发光和散射光。

二向色镜: 将激发光反射到样品上,同时将发射光透射出去。


 荧光分析BP532带通滤光片

荧光检测BP532带通滤光片

荧光检测滤光片的选用

选择合适的荧光检测滤光片,需要考虑以下因素:

荧光染料的激发和发射波长:滤光片的透光范围应与荧光染料的激发和发射波长相匹配。

背景荧光:滤光片应能有效地滤除背景荧光,提高信噪比。

光源: 滤光片的透光范围应与光源的波长范围相匹配。

 

荧光检测滤光片的重要作用

提高信噪比:通过滤除背景光,提高荧光信号的检测灵敏度。

改善图像质量:获得清晰、高对比度的荧光图像。

实现多色荧光成像:通过组合不同波长的滤光片,可以同时检测多种荧光染料。

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